艾滋病常见的几种筛查试验的探讨

导读实验室检测是作为是否感染艾滋病的最重要的依据，所以艾滋病的检测，在疾病的判断治疗中，显得尤为重要。

实验室检测是作为是否感染艾滋病的最重要的依据，所以艾滋病的检测，在疾病的判断治疗中，显得尤为重要，而艾滋病的检测方法，分为很多种，下面就各种艾滋病筛查的检测方法适用范围及特点，和大家一起探讨一下。

一、检测的样本

HIV感染的常用检测标志物为：抗体HIV-1/2,抗原P24以及HIV的RNA。艾滋病检测最常用的样品有血液，包括血清、血浆和全血以及滤纸干血斑，唾液或尿液有时也可作为测试样品。

不同的标志物，在体内产生的时间不同，所以要选用合适的标志物，以便准确确定感染的情况。

二、检测方法

艾滋病的检测分为筛查试验和补充试验。

筛查试验包括酶联免疫吸附试验（ELISA），化学发光或免疫荧光试验（CIA/IFA），快速检测（RT）及其它试验，

补充试验包括确诊试验及核酸试验，在2015年《全国艾滋病检测技术规范》中，将核酸试验也纳入到后期的补充试验中，以对筛查阳性的样品进行进一步的检测，其中确证试验主要包括免疫印迹试验（WB），条带/线性免疫试验（RIBA/LIA）。核酸试验包括核酸定性和核酸定量试验。

1、酶联免疫试验（ELISA）

ELISA有几种类型，主要为双抗原夹心法测抗体，双抗体夹心法测抗原，间接法测抗体，竞争法、捕获包被法。

试验可使用血液（包含血清、血浆和滤纸干血斑）、尿液样品，多为HIV抗体检测试剂，HIV抗原抗体联合检测试剂可同时检测血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗体，HIV抗原/抗体包被于固相载体，加入待检样品和酶标记的HIV抗原/抗体，加底物显色，用酶标仪测定结果。

2、化学发光或免疫荧光试验（CIA/IFA）

试验采用发光或荧光底物，可使用血液(包含血清和血浆)、尿液样品，既可

检测抗体，也可联合检测抗原抗体。HIV抗原/抗体包被于固相载体，加入待检样品和酶或荧光标记的HIV抗原/抗体，加发光或荧光底物，用发光或荧光仪测定结果。

3、快速检测（RT）

快速检测作为一种方便的方法，现在越来越多的应用于实际工作及个人的自测中，这种试验操作简便快速，适用于应急检测、门诊、急诊检测、VCT及检测点等，有着不可替代的优势。常用的类型为明胶颗粒凝集试验（PA），免疫渗滤试验（胶体金或胶体硒），免疫层析试验，。

明胶颗粒凝集试验（PA）：将重组HIV-1抗原(HIV-1/gp41和HIV-1/P24)和HIV-2抗原（HIV-2/gp36)包被在人工载体明胶粒子上，这些致敏粒子和血中的HIV-1抗体或HIV-2抗体发生凝集反应，由此可以检测出血清和血浆中的HIV-1/2的抗体。

免疫渗滤试验：斑点免疫胶体金（或胶体硒）快速试验：均以硝酸纤维膜为载体，HIV抗原点状或线状固定在膜上，加待检样品，利用微孔滤膜的可滤过性，使抗原抗体反应。阳性结果在膜上抗原部位显示出有色斑点或条带，有效试验的质控点必须显色，反应时间在10分钟以内。

免疫层析试验：以硝酸纤维膜为载体，HIV抗原线状固定在膜上，待检样品沿着固相载体迁移，阳性结果在膜上抗原部位显示出有色条带，有效试验的质控带必须显色，反应时间在30分钟以内。

三、检测试剂

在试验中，经常说到的是检测试剂为三代或四代之类的，这个艾滋病检测的试剂已经从第一代发展到第四代，目前基本上大都是使用三、四代的试剂，下面以ELISA试剂为例做个具体的说明。

第一代HIV诊断试剂原理为间接ELISA法，所用的包被抗原为体外培养的HIV裂解物，含有很多杂抗原，主要的HIV结构和表达的蛋白浓度不能保证，灵敏度和特异性都不高，会出现很多的假阴性和假阳性。

第二代使用的是基因重组和合成多肽抗原，利用间接ELISA原理，窗口期比第一代缩短20天，灵敏度和特异性有所提高，可以同时检测HIV-1/2抗体。

第三代利用双抗原夹心法检测标本中的抗体，酶标记物改为特异性HIV抗原，检测HIV-1/2抗体。

第四代试剂是一种HIV-1/2抗体及P24抗原的联合检测方法。

ELISA试剂	检测物	抗原来源	检测原理	窗口期（天）
第一代	IgG抗体	病毒裂解产物	间接法	35～45
第二代	IgG抗体	基因重组抗原 合成肽	间接法	25～35
第三代	igM/igG抗体	基因重组抗原 合成肽	双抗原夹心法	20～30
第四代	P24抗原，igM/igG抗体	基因重组抗原 合成肽 P24抗原的单克隆抗体	双抗原夹心法 双抗体夹心法	15～20

四、筛查报告及流程

HIV抗体筛查试验报告使用格式化的HIV抗体筛查检测报告。筛查试验无反应报告为“HIV抗体阴性”；有反应必须进行复检，复检两次检测均无反应报告为“HIV抗体阴性”，复检检测均有反应或一个有反应一个无反应需进行“补充试验”；报告为“HIV感染待确定”，不能出具阳性报告。