淋病的实验室检测分析
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性病科
2018-11-06 16:00 浏览 :9682
导读目前,我国淋病的实验室常规检测方法为:直接显微镜检查淋球菌;分离培养淋球菌;核酸检测。
淋病的实验室检测
淋病是一种常见的性病,在我国有着很高的感染人数,对人体有着很大的危害,但近几年来,从我国的淋病疫情数据分析中,揭示出很多的问题,淋病的人数是有着下降的趋势的,并且男女比例有着很大的差异,从数据分析来看,目前仍然存在着淋病病例(特别是女性病例)发现不足,这个原因有很多,但检测筛查的力度不足是一个重要的原因,很多的医疗机构,对淋病的检测还有着一些不正确的认识,下面就淋病的实验室检测做一个简单的分析。
一、淋病实验室检测方法
目前,我国淋病的实验室常规检测方法为:直接显微镜检查淋球菌;分离培养淋球菌;核酸检测。
1、直接显微镜检查淋球菌:
在显微镜直接检查中,染色是很重要的一步,染色方法一般常用的是革兰氏染色,还有美兰染液,姬姆萨染液,荧光抗体。革兰染色为传统方法,因简便、快捷及价廉,仍然为最广泛采用的方法。革兰染色将菌分为二大类,即染成紫色的革兰阳性菌及染成红色的革兰阴性菌。
直接显微镜检查的临床意义:男性淋菌性尿道炎的尿道标本敏感性及特异性可高达95%~99%,具诊断价值;宫颈标本、无症状男性尿拭子及取自直肠的涂片时,敏感性仅40~70%;不推荐直接显微镜检查诊断直肠和咽部淋球菌感染;亦不能用于疗后判愈;如果在多形核细胞外见到形态典型的革兰阴性双球菌,需做培养进行确证。
2、淋球菌培养:
培养条件:35℃~36℃,含5%~10%CO2,湿润(70%湿度)的环境。CO2环境可由CO2培养箱、CO2产气袋及烛缸提供。使用烛缸时,应使用白色、无芳香味的无毒性蜡烛,在烛缸底部放些浸水棉球以保持一定的湿度。培养时间:24~48小时。
培养24小时后检查平皿,此时没有菌生长的平皿应继续培养至48小时,仍无菌生长才可丢弃,作出淋球菌培养阴性的报告,对选择性培养基上分离的直径在0.5~1mm,无色、灰白色的半透明菌落应作进一步鉴定。
对结果初步鉴定淋球菌的主要依据,一个是看菌落特征,还有就是氧化酶试验,以及革兰染色。
来自泌尿生殖道符合初步鉴定标准的分离株,一般可诊断为淋球菌,准确性达98%。对于菌落形态不典型的分离株,来自咽部、眼睛、或其他泌尿生殖道外部位的分离株,来自低危人群(如儿童)的分离株,以及涉及医疗法律案例的分离株,应作确证试验。主要有糖发酵试验或细菌自动鉴定仪等。
分离培养法为淋病实验室检测的“金标准”,女性淋病患者,男、女直肠和咽部淋球菌感染培养的敏感性81~100%。特异性100%,可发现无症状淋球菌感染患者,可用于进一步作药敏试验,可用于治疗后的判愈试验。
但大部分医疗机构的临床上都不开展培养,因为试验需要一定的时间,而且整个试验操作较为繁琐,对医生的确诊来说,花的时间过长,不能及时给病人诊断和治疗。
3、核酸检测:
目前在我国,核酸检测还在发展之中,还有待进一步的完善,但这个检测方法是未来的趋势,在以后的工作中,一定会作为一种常规的检测,以更加利于疾病的诊断。
核酸检测一般有:经典方法,实时荧光法,全自动及快速法,目前国内大部分用的是荧光法。
它的特点是:敏感性、特异性高;不依赖于活的病原体的存在;无需特殊运送条件;可采用尿液等非侵入性标本;可以做多重项目的检测。
核酸扩增检测技术用于临床诊断面临的挑战有:所需的仪器设备和试剂价格比较昂贵,在一般实验室尚不能配备;不能做抗生素敏感性试验;用于判愈试验需在治疗后至少3周以上。
二、标本的采集
淋病的检测中,标本的采集尤其重要,如果没有规范的采集好标本,对试验的结果是有很大的影响的,可能会造成不正确的结果,对淋病的临床确诊做出错误的判断。
从人群分类采样:
1、男性:异性恋者,采集尿道标本,有口淫史者加取咽部标本;同性恋者,采集尿道、直肠及咽部标本。
2、女性:采集宫颈标本,必要时从尿道、直肠、咽部、前庭大腺和尿道旁腺取材。
3、幼女:幼女和/或处女膜未破的感染者标本:采集阴道分泌物。
4、新生儿眼炎患者:采集眼结膜分泌物。
从采样部位分类:
1、尿道:男性患者,用手指从阴茎根部向尿道口方向挤压,有症状患者可挤出脓液,用取样拭子蘸取脓液作涂片或培养。对挤压后无明显分泌物时,采用男用取材拭子插入尿道2~3cm,稍用力转动,保留数秒钟再取出,以采集到粘膜上皮细胞。
女性患者,可抵着耻骨联合轻轻按摩尿道口,挤压出分泌物。如果无明显分泌物,可用同男性相似的上述方法取材。
2、宫颈:避免使用防腐剂和润滑剂,因为这些物质对淋球菌有抑制作用。仔细检查阴道壁和宫颈,如果宫颈口外面的分泌物较多,先用无菌棉拭清除过多的宫颈粘液。将一取样拭子插入宫颈管内1~2cm,稍用力转动,保留10~30秒后取出。
3、眼部:用男性采样拭子在眼结膜处蘸取分泌物或轻绕眼结膜。
4、直肠:将取样拭子插入肛门2~3cm,从紧靠肛环边的隐窝中取材,避免接触粪便。
5阴道:青春期前女孩可采集阴道标本。将取样拭子置于阴道后穹窿10~15秒,采集阴道分泌物。
6、咽部:从咽后壁或扁桃体隐窝取材。
三、药敏试验
近年来全球淋病流行趋势严峻,淋病已成为全球公共卫生热点,淋病的耐药越来越引起重视,未来淋病的发展形势严峻。
目前耐药检测监测技术面临的挑战:耐药监测点的覆盖面不全面,不能及时发现临床治疗失败病例,临床上不能精准规范用药,对耐药的科学研究开展不足。
为了做好耐药工作,我国制定了《遏制细菌耐药国家行动计划(2016-2020年)》,进一步加强抗菌药物临床应用管理。
目前耐药方法有:琼脂纸片扩散法(定性),Etest(定量),琼脂稀释法(定量),微量稀释法(定量),全自动细菌鉴定分析仪(定性),质谱法(MALDITOF)(定性),分子生物学方法(定性)。一般常用的为琼脂纸片扩散法和Etest。
1、琼脂纸片扩散法:
特点:快速,简便,价廉,但只能用于定性,已经有大量的商品化生产,可以及时指导临床用药。
2、Etest法:
特点:快速,简便,可以进行定量,但价格高价高,也已经有了商品化的生产。可以用于指导临床用药,同时可以作为耐药的监测。
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